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注意事項(xiàng)：轉(zhuǎn)化前請(qǐng)準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。
1、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min，再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒，室溫放置1min；
2、從-80℃冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài)，置于冰盒上解凍，并做好標(biāo)記；
3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中，冰浴30min；
4、42℃熱激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基，180rpm震蕩培養(yǎng)45min；
6、6000rpm離心5min，僅留100ul上清混勻菌體沉淀；
7、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上，倒入適量玻璃珠，涂勻液體；
8、將平板正向培養(yǎng)1h，再倒置培養(yǎng)12h~16h；
9、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)12h~16h，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒
| pLNCX2蛋白表達(dá)質(zhì)粒 |
| pLVML-Myc-MCS-IRES-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒 |
| pLVML-3×HA-MCS-IRES-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒 |
| pET28a-NDH2蛋白表達(dá)質(zhì)粒 |
| pBBR1MCS2-Tac-NDH2蛋白表達(dá)質(zhì)粒 |
| pRSETB-ECFP-GABABR-m-Ypet蛋白表達(dá)質(zhì)粒 |
| pDEST15蛋白表達(dá)質(zhì)粒 |
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