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昆蟲表達質粒
  • 產品型號:上海
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2025-06-09
  • 訪  問  量:372
簡要描述:

昆蟲表達質粒注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。

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產品詳情

昆蟲表達質粒注意事項:轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態名稱和培養溫度。


1
、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質粒,室溫放置1min

2
、從-80冰箱中取出相應的感受態,置于冰盒上解凍,并做好標記;

3
、取2μl質粒加至100μl感受態中,冰浴30min

4
42熱激90s,再冰浴2min

5
、加入900μl無抗的LB液體培養基,180rpm震蕩培養45min

6
6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7
、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8
、將平板正向培養1h,再倒置培養12h~16h

9
、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養基中,震蕩培養12h~16h,根據實驗需要提取質粒

 

名稱 pIZ-OpIE-EGFP-MCS-V5-His
別稱 -
質粒宿主 昆蟲細胞
質粒用途 蛋白表達
片段類型 ORF
片段物種 空載體
原核抗性 Zeo
篩選標記 Zeo
熒光標記 綠色
啟動子 OpIE-2
復制子 pUC
感受態 DH5a
溫度 37度
背景載體 pIZ-V5-His
正向引物 EGFP-F3
 
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